Första gången denna kyrka nämns i historien är på 1100-talet men den kyrkan som finns idag byggdes på 1400-talet. Kyrkan hittar man på gamla torget i Prag. Det man får se när man kommer hit är ett av de mest dominerande byggnadsverken i staden. Den gotiska stilen visar sig tydligt på de två tornen som inte är symetriskt lika. Denna design ska representera det manliga och det kvinnliga. Ladys church fungerade som officiell stadskyrka under Hussitkriget och många Hussitiska ledare har predikat i kyrkan. Kyrkan var också en central punkt i Hussuternas uppror.
Den symbol på kyrkan som Hussiterna hade satt upp under tiden de regerade byttes snabbt ut då katolikerna tog över makten igen. De ersatte symbolem med en figur av den Heliga Maria som placerades mellan de två tornen.
I Ladys Church ligger den danske astronomen Tycho Brahe begravd i sin marmorgrav.
För besökare är kyrkan öppen under dagtid. Men kyrkan är absolut värd ett besöka under kvällstid även om den inte är öppen, den är bara så fantastiskt upplyst att det är värt ett besök.